菌种发酵，将产黄青霉菌接种到固体培养基上，在25c下培养7～10天，即可得青霉菌孢子培养物。
用无菌水将孢子制成悬浮液接种到种子罐内已灭菌的培养基中，通入无菌空气、搅拌，在27c下培养24～28h，然后将种子培养液接种到发酵罐已灭菌的含有苯乙酸前体的培养基中，通入无菌空气，搅拌，在27c下培养7天。
在发酵过程中需补入苯乙酸前体及适量的培养基。
提取精制，将青霉素发酵液冷却，过滤。
滤液在ph2～2.5的条件下，于萃取机内用醋酸丁酯进行多级逆流萃取，得到丁酯萃取液，转入ph7.0～7.2的缓冲液中，然后再转入丁酯中，将此丁酯萃取液经活性炭脱色，加入成盐剂，经共沸蒸馏即可得青霉素g钾盐。
青霉素g钠盐是将青霉素g钾盐通过离子交换树脂（钠型）而制得。
半合成青霉素，以6apa为中间体与多种化学合成有机酸进行酰化反应，可制得各种类型的半合成青霉素。
<是利用微生物产生的青霉素酰化酶裂解青霉素g或v而得到。酶反应一般在40～50c、ph8～10的条件下进行；酶固相化技术已应用于6apa生产，简化了裂解工艺过程。
<也可从青霉素g用化学法来裂解制得，但成本较高。
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